產品概述
內皮抑素對內皮細胞的抗生長和抗遷移作用是眾所周知的。因此，它作為血管生成抑制劑降低維持腫瘤生長的血液供給的潛在應用備受關注。內皮抑素最開始被認為是從鼠科動物的血管內皮瘤（EOMA）細胞中識別的膠原蛋白XVIII的20 kDa 蛋白水解片段。人膠原蛋白XVIII由包含至少兩個變體的N-端區域，中心三螺旋區域和C-端非成膠區域(NC1)組成，而內皮抑素來自于C-端非成膠區域。人內皮抑素從非成膠（NC1）區域釋放的過程還不甚清楚。然而，組織蛋白酶L（Cathepsin L）和彈性蛋白酶(Elastase)被認為是在血管內皮瘤（EOMA）細胞中負責其產生的蛋白酶。健康捐獻者血清內皮抑素的平均濃度是變化的，大約是20ng/ml。
產品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。抗人Endostatin單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的Endostatin會與單抗結合，游離的成分被洗去形成免疫復合物；加入生物素化的抗人Endostatin抗體，生物素化抗人Endostatin抗體與酶標板上結合的標準品或樣本中的Endostatin結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，親合素與生物素特異性結合，游離的成分被洗去。加入顯色底物（顯色劑），若反應孔中有Endostatin，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍，加終止液變黃。在450nm處測OD值， Endostatin濃度與OD450值之間呈正相關，可通過繪制標準曲線求出標本中Endostatin濃度。
產品性能
1. 靈敏度：最小可測人Endostatin達30pg/ml 。
2. 重復性：板內、板間變異系數均<10%。
產品組分及儲存條件
名稱
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96 Tests
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48 Tests
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保存條件
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1. 抗體包被板條 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2．標準品 (Standard)
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2 支（凍干）
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1 支（凍干）
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2-8℃
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3．濃縮生物素化抗體 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 （60μl/支）
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1 支（60μl/支）
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2-8℃
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4．濃縮酶結合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 （60μl/支）
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1 支（60μl/支）
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2-8℃（避光）
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5．試劑稀釋液 (Assay Diluent)
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4 瓶（25ml/瓶）
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2 瓶（25ml/瓶）
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2-8℃
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6．濃縮洗滌液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 （30ml/瓶）
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1 瓶（30ml/瓶）
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2-8℃
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7．顯色劑 (Substrate Solution)
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1 瓶（12ml/瓶 ）
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1 瓶（6ml/瓶）
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2-8℃（避光）
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8．終止液 (Stop Solution)
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1 瓶（12ml/瓶）
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1 瓶（12ml/瓶）
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2-8℃
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9．封板膠紙
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3 張
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2 張
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10．說明書
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1 份
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1 份
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試驗所需自備儀器和試劑:
1. 酶標儀(450nm檢測波長濾光片，570nm或630nm校正波長濾光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10μl，2-20μl，20-200μl，200-1000μl。
3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標紙。
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